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2016年第9期    钙拮抗剂改善铁诱导的大鼠胚胎海马神经干细胞凋亡

陈文雄1,黄珍妮2,杨默3,吴武田4,苏焕兴5,陈志峰2

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  • 注:所有内容请以纸质版为准。
  • 【摘要】  

    目的探讨钙拮抗剂对铁诱导的原代神经干细胞损伤是否具有保护作用。方法以大鼠胚胎(E17.5)海马神经干细胞(hNSC)为细胞模型。首先鉴定hNSC的神经干细胞特征,确认其表达L型钙通道Cav1.2基因mRNA及相关蛋白;然后分别给予细胞如下处理:①对照;②加铁(0.9 mmol/L铁剂);③加钙拮抗剂(氟桂利嗪0.1 μmol/L或尼莫地平10 nmol/L);④钙拮抗剂+铁,观察钙拮抗剂对铁诱导的hNSC细胞活性及凋亡的影响;最后观察铁超负荷对细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/ERK激酶(MEK)抑制剂U0126对铁诱导细胞活性的影响。免疫组化法鉴定细胞神经干细胞特征;逆转录聚合酶链反应(RT\|PCR)法检测Cav1.2基因mRNA表达,免疫组化法及流式细胞仪法检测蛋白表达;XTT比色法检测细胞活性;Annexin V/碘化丙啶(PI)流式细胞仪检测细胞凋亡;抗磷酸化\|ERK1/2流式细胞仪检测ERK磷酸化水平。结果hNSC呈现典型神经干细胞特征,表达Cav1.2基因mRNA(158 bp)及相关蛋白;钙拮抗剂可以显著增加临床相关浓度(0.9 mmol/L)铁超负荷诱导的hNSC的细胞活性(尼莫地平,P<0.01),以及减少细胞凋亡;临床相关浓度铁超负荷可以诱导hNSC ERK磷酸化,MEK抑制剂U0126可显著增加铁损伤hNSC的细胞活性(P<0.01)。结论钙拮抗剂改善铁诱导的大鼠胚胎hNSC凋亡,可能通过抑制ERK磷酸化过程。


  • 【关键词】铁超负荷;神经干细胞;钙拮抗剂;神经退行性障碍;出血性脑卒中;细胞外信号调节激酶
  • 【正文快照】 钙拮抗剂改善铁诱导的大鼠胚胎海马神经干细胞凋亡 中国高血压杂志, 2016,V31(9): 0-0 , 2016,V31(9): 0-0
  • 【分类号】37483
  • 【基金项目】香港大学CRCG-HKU研究基金(10207982-08296-21100-323)